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TUhjnbcbe - 2024/9/14 16:20:00
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肺腺癌是发病率较高的恶性肿瘤之一,其发生机制与基因突变及环境因素密切相关,然而,对于研究肺腺癌的重要性,我们仍不能忽视肺腺癌组织源的获取及相关的细胞培养研究。本文将对于人肺腺癌细胞的来源、培养技术、复苏、培养基选择、细胞污染、传代、冻存、以及进行相关研究创作等方面进行详细阐述,旨在为肺腺癌研究领域的科研人员提供有价值的信息和参考,进而更好地推进相关研究。

一、人肺腺癌细胞来源

1.组织样本来源

对于肺腺癌的细胞研究而言,基础的组织样本来源是必不可少的。目前,组织样本来源主要有三种:手术切除、肺穿刺以及支气管镜下取样。手术切除是获取高质量肺腺癌组织的重要方法,其样本来源较纯,不易被正常组织污染,适合于细胞培养和研究。肺穿刺和支气管镜下取样较为简单,可以进行实时病理学诊断,且未经化疗和放疗处理的样本适于培养研究,但其中可能会含有正常肺组织。

2.细胞系来源

除了从患者的组织样本中进行细胞培养之外,人肺腺癌细胞系也是重要的来源之一。当前已有若干种来源于肺腺癌的细胞系,如NCI-H23、A、HCC、Calu-3等。这些细胞系的应用涵盖了肿瘤生物学、病因学及治疗学等领域,但在其培养前需要充分确认其来源及生物学特性,以确保研究结果的准确性。

二、肺腺癌细胞的培养技术

1.细胞培养器

肺腺癌细胞管培养技术的发展伴随着细胞培养器的不断升级,如今常用的细胞培养器主要有普通的菌箱、CO2培养箱、培养箱及生物反应器等,这些设备可以提供细胞正常的生长环境,如恒定的温度、湿度以及二氧化碳含量等。

2.培养基选择

培养基是肺腺癌细胞培养的重要基础,培养基种类较多,如DMEM/F12、RPMI-、MEM、DMEM等。近年来,针对人肺腺癌细胞的培养液种类和配方不断丰富,如Cai等人研制的混合培养基,经调整可支持NCI-H23、A、H等多种人肺腺癌细胞系的生长。

3.细胞培养条件

细胞培养条件不同,可能会影响肺腺癌细胞的生长和繁殖。一般要求细胞培养环境温度恒定(约为37℃)、温度升高时必须有二氧化碳气体供应,培养液中含有培养所需的营养物质及生长因子等。

三、肺腺癌细胞的复苏、培养及传代

1.细胞的复苏

细胞复苏是指将冻存细胞从液氮中取出后,在特定条件下使其复活,取出后要进行快速解冻,以避免细胞在解冻过程中受到的机械损伤或细胞膜冻融造成的化学损伤等(例如可以在37℃的水浴中快速解冻)。解冻后的细胞可以在37℃、5%CO2培养箱中培养,使用含少量FBS的培养基。

2.细胞的传代

为了长期保持肺腺癌细胞的生长和稳定性,需要对细胞进行传代。具体方法为:将培养好的细胞用0.25%的胰酶溶解,离心收集,用新培养液重新培养。

四、肺腺癌细胞的污染及冻存

1.细胞污染

肺腺癌细胞污染是指培养中存在细菌、真菌、毒素等不相关或不是自己研究细胞的细胞,在培养过程中对研究产生干扰。为了避免细胞污染,应严格按照无菌操作和培养规范操作。

2.细胞的冻存

为了保持肺腺癌细胞的长期保存,需要进行冻存。具体方法为:用DMSO和10%的FBS将细胞混合,以1ml/vial的体积存储在液氮盒中保存,以备以后使用。

五、进行相关研究思路

1.肺腺癌的基础研究

肺腺癌作为较常见的肿瘤类型之一,在病因产生、肿瘤分化及转化、细胞信号途径等多个方面仍有待深入研究。此时,通过肺腺癌细胞系的培养和相关研究可以加深对疾病的了解,也可以为了解肿瘤的相应生物学特征、筛选并评价新型治疗药物提供有价值的支持。

2.肺腺癌的治疗研究

肺腺癌治疗的研究之一是开发针对肺腺癌的新型治疗药物,细胞系的创建和维护是进行药物筛选和评价的关键。各种人源性肺腺癌细胞系目前广泛应用于治疗药物筛选和新型抗癌药物的评价及其药理学和毒理学性质的描述。细胞的相关研究有助于开发具有更好临床应用前景的针对性治疗药物,并更好地推进肺腺癌治疗方案的研究与临床应用。

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