新疆白癜风微信交流群 https://www.lvyouxfnet.com/48774.html00:35K悬浮细胞培养步骤
K细胞是一种常用的人类慢性髓系白血病细胞系，它们通常以悬浮生长的方式培养。以下是基于搜索结果的K细胞培养步骤：
培养基准备：K细胞推荐使用含有10%胎牛血清的RPMI-培养基，并添加适量的抗生素。
培养条件：将培养瓶置于37°C、5%二氧化碳的培养箱中，保持适宜的湿度条件。
细胞接种：收到细胞后，将T25瓶在37°C培养箱放置约2-3小时，然后通过rpm离心5分钟去除培养基和细胞，重悬后接种到新的培养瓶中，加入新鲜的完全培养基。
细胞传代：当细胞密度达到80%-90%时，进行传代。悬浮细胞传代时，收集细胞悬液，通过离心去除上清液，重悬后按1:2至1:3的比例分到新的培养瓶中，并添加足够的新鲜培养基。
细胞冻存：为了长期保存细胞，可以在培养前3代时进行冻存。冻存液通常由90%血清和10%DMSO组成，细胞密度建议为1×10^6至1×10^7个活细胞/ml。冻存后的细胞应在-80°C过夜，然后转移到液氮中储存。
细胞复苏：将冻存管在37°C水浴中迅速解冻，加入含有4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀，离心后去除上清液，并用完全培养基重悬细胞，然后在37°C培养过夜。
日常维护：建议每周更换新鲜培养基2-3次，以维持细胞的健康生长状态
